一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中的三聚氰胺和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭三聚氰胺抗體，加入酶標(biāo)記物后，用底物顯色，樣本吸光值與其所含殘留物三聚氰胺的含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)三聚氰胺的含量。
 
二、試劑盒檢測限
試劑盒檢測限：         10 ng/mL
 
三、 試劑盒組成
1．預(yù)包被板：96T
2．標(biāo)準(zhǔn)品液：（1mL/瓶） 0 ng/mL、20 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL
3．酶標(biāo)記物          12 mL 
4．抗體工作液         7 mL
5．底物緩沖液         7 mL
6．底物液             7 mL
7．終止液             7 mL
8．20倍濃縮洗滌液    50 mL 
 
四、樣本處理
配制樣品稀釋液：
稱取89.5 g Na2HPO4·12H2O ，蒸餾水定容至1000 mL。
 
濕的寵物食品萃取方法（稀釋100倍）
1．勻質(zhì)樣品到布丁狀；
2．稱取2 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將其收集于干凈試管中；
5．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
6．取50 μL進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
 
干的寵物食品萃取方法（稀釋200倍）
1．均質(zhì)干的寵物飼料樣品；
2．稱取1 g樣品加入10 mL 60%甲醇水溶液，并劇烈振蕩；
3．超聲萃取1 min，漩渦混合1 min，然后靜止5 min，使樣品分層；
4．5000 r/min室溫離心5 min，用玻璃纖維濾紙過濾上清液，并將萃取液收集于干凈試管中；
6．用樣品稀釋液將濾液20倍稀釋；
7．取50 μL進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
 
 
液態(tài)奶/乳飲料（稀釋5倍）
1．  準(zhǔn)確吸取1 mL液態(tài)奶或乳飲料于干凈離心管中，冷藏至4℃?zhèn)溆茫?br />2．  將1 mL液態(tài)奶或乳飲料樣品置于離心機(jī)中，5000 g離心10 min（建議10℃低溫離心），分離樣品中脂肪；
3．  棄上層脂肪，取0.2 mL離心后的脫脂液態(tài)奶或乳飲料試樣于干凈試管中；
4．  加入0.8 mL樣品稀釋液于離心后的脫脂液態(tài)奶或乳飲料中，振蕩混勻樣品，取50 μL進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
奶粉（稀釋25倍）
1． 稱取1 g奶粉樣品于干凈試管中；
2． 加入5 mL的45～50℃溫水溶解奶粉并混勻后冷藏至4℃?zhèn)溆茫?br />3． 取1 mL溶解好的奶粉試樣于離心管中，5000 g離心10 min（建議10℃低溫離心），棄上層脂肪，取0.2 mL試樣于干凈試管中；
4．加入0.8 mL樣品稀釋液于試管中，振蕩混勻取50 μL進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
酸奶：（稀釋5倍）
1． 準(zhǔn)確吸取1 mL液態(tài)奶或乳飲料于干凈離心管中，將PH值調(diào)至6～8，冷藏至4℃?zhèn)溆茫?br />2． 將1 mL樣品置于離心機(jī)中，5000 g離心10 min（建議10℃低溫離心），棄上層脂肪，取0.2 mL試樣于干凈試管中；
3． 加入0.8 mL樣品稀釋液于試管中，振蕩混勻取50 μL進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
初乳樣品：（稀釋1倍）
直接法：將樣品4℃冷藏30 min后，4000 r/min離心15 min，棄去上層脂肪，取50 μL進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。