液相色譜儀是在經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上,引入氣相色譜的理論和技術(shù)而發(fā)展起來的。在液相色譜中,流動相與組分之間有一定的親和力,分離過程的實現(xiàn)是組分、流動相和固定相三者間相互作用的結(jié)果,分離不但取決于組分和固定相的性質(zhì),還與流動相的性質(zhì)密切相關(guān),一般情況下,液相色譜儀的分析可在室溫下進(jìn)行,由于采用顆粒極細(xì)的固定相,柱內(nèi)壓降很大,加上流動相黏度高,因此必須采用高入口壓,以此來維持一定的流動相線速。液相色譜儀對于揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的物質(zhì)特別有利,它在醫(yī)藥、生化等方面具有非常重要的作用。
液相色譜儀的輸液泵有兩種類型,即通常稱謂的恒流泵和恒壓泵。恒流泵使輸出的液體流量穩(wěn)定;而恒壓泵則使輸出的液體壓力穩(wěn)定。恒流泵中有往復(fù)泵,注射泵;恒壓泵有氣動放大泵。
1、往復(fù)泵
在hplc中應(yīng)用最多的是往復(fù)泵,這種泵使用帶有往復(fù)活塞或柔韌隔膜的小體積泵室。往復(fù)泵有兩類,一種是活塞式,另一種是隔膜式。前者的活塞直接和流動相接觸;后者的活塞是通過某種介質(zhì)推動隔膜,隔膜再壓縮或吸入流動相。
2、累積型往復(fù)泵
累積型往復(fù)泵有兩個泵頭,以串聯(lián)方式連接在一起,這樣可以提供平穩(wěn)的液流。所以如此是因為兩個泵腔排液體積不同,第一級泵腔是第二級泵腔的2倍。
3、注射泵
注射泵類似于注射器,用一臺步進(jìn)電機(jī)驅(qū)動注射泵的活塞把液流從泵腔中擠出,泵腔體積較大,密封性好的活塞使泵腔中的液體等蘇流出。
4、氣動放大泵
氣動放大泵是利用氣體為動力源,通過帕斯卡原理把氣體的壓力放大成流動相的壓力。這種泵可以用較小的氣體壓力得到較高的流動相壓力,所以它很適合于液相色譜柱的裝填。
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